三、紫外线消毒
(1)紫外线杀菌的机理及规则
紫外线杀菌的原理较为复杂,一般认为它与对生物体内代谢、遗传、变异等现象起着决定性作用的核酸相关。微生物病毒、噬菌体内都含有RNA和DNA,而RNA和DNA的共同特点是具有由磷酸二酯按照嘌呤与嘧啶碱基配对的原则相连的多核苷酸链,它对紫外光具有强烈的吸收作用并在260nm有最大值吸收。在紫外光作用下,核酸的功能团发生变化,出现紫外损伤,当核酸吸收的能量达到细菌致死量而紫外光的照射又能保持一定时间时,细菌便大量死亡。
波长在200-300nm之间的紫外线有灭菌作用,其灭菌效果因波长而异,其中以254-257nm波段灭菌效果最好。这是因为细菌中的脱氧核糖核酸(DNA)核蛋白的紫外吸收峰值正好在254-257nm之间。如将该波段紫外线的灭菌能力定为100%,再同其他波长紫外线的灭菌能力作比较,其结果如表3.1所示。由表可以看出,超过或低于254-257nm的紫外线,随波长的增加或减少,灭菌效果均急剧下降。
表3.1 不同波长的紫外线灭菌能力
波长/nm220230240250254257260270280290300310360400
相对灭菌率/%0.250.40.630.911.01.00.990.870.60.50.060.0130.00030.0001
紫外线的灭菌效果同紫外线的照射量不成线性关系,即被杀死细菌的百分数并不是与照射剂量成正比的(紫外线照射量等于紫外线的辐照度值乘以时间)。只有在照射量很低而细菌数目又很多的时候,紫外线照射量才同细菌的死亡率呈线性关系。当紫外线照射量加大后,每单位剂量的紫外线的增量,并不杀死一定数目的细菌,而是杀死当时还活着的细菌中间某一特定百分数的细菌。从这个意义上看,在紫外线杀菌过程中,微生物的死亡也遵循湿热灭菌的对数规则(参见中国药典附则)。
即N/N0=e -KD
式中 N0--紫外线照射前的细菌数目;
e--紫外线照射后的细菌数目;
D--紫外线剂量大小;
K--常数。
表3.2示出了紫外线不同照射量时的灭菌率。表中可清楚地看出,对不同细菌要达到同一灭菌率时,所需的紫外线照射量相差甚大。例如酵母菌要达到90%~100%的灭菌率时,需要紫外线照射量为14700μW?s/cm2。而大肠杆菌则需1550μW?s/cm2,二者相差10倍。
(2)紫外线杀菌装置
紫外线杀菌装置结构,由外壳、低压汞灯、石英套管及电气设施等组成。外壳由铝镁合金或不锈钢等材料制成,以不锈钢制品为好。其壳筒内壁要求有很高的光洁度,要求其对紫外线的反射率达85%左右。
紫外线杀菌灯为高强度低压汞灯,可放射出波长为253.7nm的紫外线,这种紫外线的辐射能量占灯管总辐射能量的80%以上,为保证杀菌效果,要求其紫外线照射量大于3000μW?s/cm2,灯管寿命一般不短于7000h。
紫外灯的灯管是石英套管,这是由于石英的污染系数小,耐高温,且石英套管对253.7nm的紫外线的透过率高达90%以上,但石英价格较贵,质脆、易破碎。
紫外线杀菌装置的电气设施包括电源显示、电压指示、灯管显示、事故报警、石英计时器及开关等。经验表明,使用紫外线灭菌时,由于长期使用紫外线,有可能使杀菌装置或其附近的非金属材料老化,使之降解,导致电阻率的改变。因此,对紫外杀菌器的质量要求主要有两点:一是高的杀灭率,一般要求大于99.9%;二是当纯水或高纯变化的水通过该装置后,电阻率降低值不得超过0.5MΩ?CM(25℃)。