生药的理化鉴定是利用物理的或化学的方法,对生药及其制剂中所含主要化学成分或有效成分进行定性和定量分析,来鉴定生药品质优良度的一种方法。一般应用于含不同化学成分生药的鉴定,及生药同名异物,或性状相似又无明显显微特征的生药鉴别。同时,用理化鉴定方法检查样品含化学成分的性质和类型,也有助于发现新药源或寻找代用品。
理化鉴定分为定性分析和定量分析两类:定性分析确定生药的真实性;定量分析说明生药有效成分的含量,确定生药的品质优良度。理化鉴定的实验方法一般用少量干粉,切片或生药经初步提取分离后,选择理化反应速度快、灵敏度高的方法进行。当前,随着生药有效成分研究的深入和现代仪器分析技术的提高,生药的鉴定从宏观和微观的形态学鉴定向有效成分和药效鉴定方向发展,理化鉴定的方法和手段也正在不断的更新和发展。现将常用的理化鉴定方法介绍如下:
一、显微化学反应
显微化化学反应是将生药的干粉、手切片或浸出液少量,置于载玻片上,滴加某些化学试剂使产生沉淀或结晶,在显微镜下观察反应结果;或产生特殊的颜色,从而进行鉴定。
1. 将生药切片或粉末置载玻片上,滴加各种试液,加盖玻片,稍放置,在显微镜下观察产生的结晶、沉淀或颜色。例如:
黄连粉末滴加稀盐酸,可见针簇状小檗碱盐酸结晶析出;或滴加30%硝酸,可见针状小檗碱硝酸盐结晶析出。
直立百部鲜块根切片,滴加氯化金试液,于皮层细胞中有微黄色玫瑰花状结晶(示生物碱反应)。
肉桂粉末加氯仿2~3滴,略浸渍,速加2%盐酸苯肼1滴,可见黄色针状或杆状结晶(示桂皮醛反应)。
2. 取生药粗粉加适当溶剂浸提成分,将浸出液置载玻片上,滴加各种试液,加盖玻片,在显微镜下观察反应。
例如:槟榔粉末0.5g,加水3~4ml及稀硫酸1滴,微热数分钟,取滤液于玻片上,加碘化铋钾试液,即发生浑浊,放置后可见石榴红色球形或方形结晶(示槟榔碱反应)。
3. 取生药切片或粉末,滴加名种试液,直接观察呈现的颜色。例如:
番木鳖胚乳薄片置白磁板上,加1%钒酸铵的硫酸溶液1滴,迅速显紫色(示番木鳖碱);另取切片加发烟硝酸1滴,显橙红色(示马钱子碱)。
甘草粉末置白磁板上,加80%硫酸1~2滴,显橙黄色(示甘草甜素反应)。
4. 显微化学定位试验:利用显微和化学方法,确定生药有效成分在生药组织构造中的部位,称显微化学定位试验。
如北柴胡横切片加1滴无水乙醇-浓硫酸(1:1)液,在显微镜下观察可见木栓层,栓内层和皮层显黄绿色~蓝绿色,示此柴胡的有效成分柴胡皂甙存在于以上部位。