[摘　要] 　目的：采用HPLC/ UV 法对玄参药材进行指纹图谱的研究。方法：采用Agilent ZORBAX SB2C18柱(250 mm×416 mm ，5μm) ，甲醇和011 %甲酸为流动相梯度洗脱，流速：1 mL/ min。结果：得到分离度、精密度和重复性均较好的玄参药材HPLC/ UV 指纹图谱。结论：本方法可用于玄参药材的指纹图谱测定，并为其全面质量控制提供参考。

    [关键词] 　玄参；指纹图谱；HPLC；质量控制
   
    玄参为常用中药，具有凉血滋阴、泻火解毒之功效，药典规定玄参为玄参科植物玄参Scrophularia ningpoensis Hemsl1 的干燥根，但未见收载其质量控制方法。中药指纹图谱是近年提出的、国际上公认的控制中药或天然药物质量的最有效手段之一，是推动行业全面进步的关键技术之一[。本文采用HPLC/ UV 方法对玄参药材的乙醇提取物进行分离分析，得到了分离度、精密度和重现性均较好的药材指纹图谱，为全面评价玄参药材的质量提供了参考。

    1 　仪器与试剂
   
    Agilent 1100 LC/ DAD 系统，含在线真空脱气机、低压四元梯度泵、自动进样器、柱温箱、光二极管阵列检测器，HP Chemstation 色谱工作站。甲醇(色谱级) ，甲酸(分析纯) ，双重蒸馏水；玄参药材产自浙江磐安，经中国药科大学中药学院徐珞珊教授鉴定为玄参Scrophularia ningpoensis Hemsl1； 肉桂酸对照品由金陵药业股份有限公司技术中心提供。

    2 　方法与结果

    2.1 　供试品的制备：取玄参药材适量，60 ℃干燥4 小时，粉碎，过40目筛。取药材粉末5.0 g，置100 mL 锥形瓶中，加无水乙醇50 mL ，超声30 min ，滤过。取续滤液5 mL 挥干，加2 mL 50 %甲醇溶解，用0145μm 微孔滤膜滤过作为供试品溶液。取肉桂酸对照品适量，用50 %甲醇溶解，制成每毫升含150μg 的溶液作为参照物溶液。

    2.2 　液相色谱条件及分析方法
   
    色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18 柱( 250 mm×4.6 mm ，5μm) ；流动相：A：0.1 %甲酸，B ：甲醇；梯度洗脱： 0 min ： 40 %B ，25 min ： 60 %B ，45 min ： 90 %B ，60 min ：stop ；流速：1 mL/ min ；柱温：25 ℃；检测波长：280 nm；参比波长：400 nm；进样量：20μL 。

    2.3 　方法学考察

    2.3.1 　空白试验：吸取溶剂20μL ，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，结果见图1（略）。

    2.3.2 　对照试验：吸取参照物溶液20μL ，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，结果见图2（略）。

    2.3.3 　精密度试验：取供试品溶液(批号3) ，连续进样6 次，测得各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD 小于1.0 % ，表明进样精密度良好。

    2.3.4 　重现性试验：取供试品药材(批号3) 6 份，分别按“2.1”项下方法制备供试品溶液，并进样分析，测得各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD 小于2.8 % ，表明方法重现性较好。

    2.3.5 　稳定性试验：取同一供试品溶液(批号3) ，分别在0 ，2 ，4 ，6 ，8 ，12 ，24 h 进样，测得各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD 小于1.9 % ，表明样品溶液在24 h 内稳定。

    2.4 　玄参药材指纹图谱及各项技术参数：根据测定的同一产地10 批药材的指纹图谱，并参照“中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行) ”，经比较发现其中8 峰是各批供试品所共有的，且峰面积较为稳定，因此确定8 个峰为共有指纹峰。标准玄参药材指纹图谱见图3（略） ，10 批供试品检测结果见表1、表2 和表3。