山茱萸为山茱萸科植物山茱萸Cornus officinalis Sieb.et Zucc.的干燥成熟果肉。具有补益肝。肾,涩精固脱等功效。山茱萸含挥发油、有机酸和环烯醚萜苷类等多种化学成分,具有多种药理活性。本文对山茱萸的化学成分、含量测定、药动学、药理作用以及研究与开发等方面的最新进展作一综述。
1化学成分
1.1 挥发性成分:果肉中含有挥发油.经气相色谱分析证明,其中有9种单萜烃、6种倍半萜烃、5种脂肪烃、7种单萜醇、6种脂肪醇、4种单萜醛及酮、3种脂肪醛及酮、4种酸、8种酯和15种芳香化合物,其中含量较多的主要成分有异丁醇、丁醇、异戊醇、芳樟醇氧化物、β-苯乙醇、甲基丁香油酚、棕榈酸乙酯、油酸乙酯、亚油酸乙酯、桂皮酸苄酯、棕榈酸和硬脂酸等。
1.2 糖苷类及其苷元:苷类成分除山茱萸苷(cornin,即马鞭草苷verbenalin)外,还分到8种单体,含量最高的是马钱素(loganin)和莫诺苷(morroniside),另含獐牙菜苷(sweroside)、7-O-甲基莫诺苷(7-O-methylmorroniside,疑为提取过程中的次生产物)、脱水莫诺苷、7-脱氢马钱素(7-dehydrolo-ganin)及一种新的双环烯醚萜苷类化合物山茱萸新苷(cor-nuside),该苷中马钱素和莫诺苷两部分通过醚键相连接。从制萸肉中分得7一乙氧基莫诺苷(可能是由于乙醇的提取,也可能因酒的炮制产生的次生产物)。同时鉴定含有7-O-没食子酰-D-景天庚酮糖、葡萄糖、果糖和蔗糖。
1.3有机酸及其酯:果肉含熊果酸、2a-羟基熊果酸、齐墩果酸、没食子酸、苹果酸、酒石酸、原儿茶酸和3,5-二羟基苯甲酸等。
1.4鞣质类及其他成分:果肉含水杨梅素D,山茱萸鞣质1(即异诃子素,又名菱属鞣质),山茱萸鞣质2(即新唢呐草素Ⅱ),山茱萸鞣质3(即新唢呐草素I)等11种鞣质,包括4种没食子酸鞣质和7种鞣花鞣质。果肉及果核中均含有苏氨酸、缬氨酸、天门冬氨酸等17种氨基酸和钾、钙、镁、硅、磷等23种矿物元素和维生素A,B2,C等。还含有5-羟甲基糖醛、5,5-二甲基糠醛醚和β-谷甾醇等。
2含量测定
2.1高效液相色谱法
2.1.1 RP-HPLC法测定马钱素和莫诺苷含量:张兰桐等报道了高效液相色谱法同时测定山茱萸注射液中的马钱素和莫诺苷的含量。色谱柱为Kromasil-100 C18柱,流动相为0.05 mol/L NaH2PO4缓冲液一乙腈(6.4:1),马钱素和莫诺苷的平均回收率分别为99.79%和99.73%(n=6)。可作为山茱萸注射液质量控制方法。
潘扬等采用RP?HPLC法对不同加工方法及药用部位山茱萸中马钱素的含量进行测定。固定相为WYG C18,色谱柱(250 mm×4.6 mm),流动相为甲醇一水(30:70),检测波长为236 nm,结果山茱萸中马钱素含量为0.09%-1.03%。提示山茱萸不同加工方法及药用部位均含有一定的马钱素,但其含量有明显的差异,其规律为生品的含量高于炮制品,果肉的含量高于果核。
《中华人民共和国药典》(2000年版)山茱萸质量控制仅收载熊果酸(脂溶性成分)的薄层扫描定量分析法(规定不得少于0.20%),显然这对大部分制剂是不适用的,特别是当山茱萸采用水煎煮或低浓度乙醇提取工艺时,马钱素、莫诺 苷等环烯醚萜苷类化合物是山茱萸中主要的水溶性成分,生物活性很强。近年来国内先后报道山茱萸的免疫抑制活性,从而纠正了它是免疫促进药的传统观念。进一步的实验表明,山茱萸不同成分的免疫药理作用不同,总苷是其主要免疫抑制成分。因此,认为有必要加强对这类成分的含量控制,以保证山茱萸及其制剂的质量。
2.1.2 RP?HPLC法测定熊果酸含量:《中华人民共和国药典》(2000年版)采用索氏提取、薄层色谱分离,用薄层扫描法测定山茱萸有效活性成分熊果酸的含量。该法操作繁琐,又费时间。文献采用超声波提取、高效液相色谱法测定熊果酸,具有精密度高、检测速度快、分离效果好、重现性好的特点。通过比较,二者所测得含量基本一致。证实后者取代前者是完全可行的。
2.1.3 RP?HPLC法测定没食子酸含量:采用C18柱,流动相为水一乙酸(98:2),紫外检测波长272 nm。结果没食子酸检测线性范围为0.4-10μg,最小检测限为6 ng,重现性试验RSD为0.48%,精密度试验RSD为0.38%,平均回收率100.7%,RSD为2.58%。采用此法测定浙江、北京、安徽、陕西、河南等产地的山茱萸药材,发现北京药材没食子酸含量最高,达0.24%,而久置的浙江、陕西药材含量仅有北京药材的一半;浙江产采集时期不同的样品,久置者没食子酸含量有所下降。本法灵敏度高、重现性好,可作为评价山茱萸药材质量的一种方法。
2.2气相色谱法:山茱萸核粗粉40g,置索氏提取器中,乙醚浸泡24h后提取5h,挥尽乙醚后称取1g,先用硫酸一甲醇混合液进行甲酯化,再用气相色谱仪测定脂肪酸的种类与含量。结果表明,山茱萸核的油酯中含有月桂酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸等,不饱和脂肪酸含量很高,在90%以上,其中亚油酸占71%左右。提示该核油可能具有重要的药用价值。 |